Organizacao do genoma de Trypanosoma cruzi: mapeamento fisico e genetico de uma regiao de 880 kb dos cromosomas que contem os genes codificadores dos antigenos imunodominantes H49 e JL8

Organizacao do genoma de Trypanosoma cruzi: mapeamento fisico e genetico de uma regiao de 880 kb dos cromosomas que contem os genes codificadores dos antigenos imunodominantes H49 e JL8

Título alternativo Genomic organization of Trypanosoma cruzi: physical and genetic mapping of region 880 kb of chromossomes which code imunodominant H49 antigen an JL8 genes
Autor Santos, Marcia Regina Machado dos Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo No Trypanosoma cruzi, agente etiologico da doenca de Chagas, a maioria das proteinas antigenicas descritas ate hoje possuem dominios repetitivos. Em trabalhos anteriores nosso grupo isolou um clone recombinante genomico, chamado H49, que codifica repeticoes de 68 aminoacidos presentes em um antigeno de alto peso molecular (Cotrim et al., 1990). O antigeno H49 e uma proteina estrutural associada ao citoesqueleto do parasita, localizando-se na regiao de interacao do flagelo com o corpo celular (Cotrim et al., 1990 e 1995). Levin e col. (1989) isolaram um clone de cDNA, denominado JL8, codificando repeticoes de 14 aminoacidos presentes em uma proteina de 200 kb. O antigeno JL8 tem localizacao citoplasmatica e sua funcao ainda nao foi determinada (Lafaille et al., 1989, Levin et al., 1989). Os antigenos H49 e JL8 contem epitopos imunodominantes reconhecidos por anticorpos presentes na maioria dos soros de pacientes chagasicos cronicos (Franco da Silveira, 1992). O objetivo do nosso trabalho foi anlisar a organizacao dos genes h49 e jL8, e construir um mapa fisico da regiao cromosomica que contem os loci h49 e jL8. Isto foi feito por analises de Southern blot contendo megafragmentos genomicos obtidos por digestoes com enzimas de restricao que raramente tem sitios de reconhecimento. Utilizamos tambem o isolamento de clones YAC com sobreposicao (overlapping) constituindo um cotigdos cromosomas. Analises de restricao do DNA genomico e sequencialmento de clones genomicos e de cDNA indicaram que a maioria da proteina H49 e constituida de repeticoes de 68 aminoacidos, dispostas em tandem. O tamanho do gene foi estimado ser de aproximadamente 8 kb, baseando-se no tamanho do transcrito e da proteina nativa (300 kDa). A conservacao dos nucleotideos entre as repeticoes indicam que a homogeneizacao seletiva de sequencia, as da provalvemente atraves de conservacao genica mantendo conservada a sequencia de aminoacidos. As formas alelicas do gene h49 foram mapeadas em dois fragmentos genomicos de cerca de 20 kb gerado por diGestão com a enzima de restricao EcoRI. Em algumas cepas um alelo adicional foi localizado em um fragmento Eco RI de 9,7 kb. Baseando-se no tamanho do gene h49 (8 kb) nos assumimos que o fragmento genomico de 9,7 kb deve conter uma copia do gene h49 enquanto o fragmento de 20 kb conteria duas copias. Em varias cepas de T. cruzi, os genes h49 e jL8 foram mapeados em duas bandas cromosomicas de 2,6 Mb. ... (au)
Assunto Trypanosoma cruzi
Epitopos Imunodominantes
Mapeamento Cromossômico
Mapeamento de Epitopos
Idioma Português
Data 1998
Publicado em São Paulo: [s.n.], 1998. 141 p.
Editor Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 141 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/15668

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